随着居民消费升级，高端牛肉、羊肉、特种畜禽肉市场规模持续扩大，肉类掺假、疫病输入、食源性微生物污染成为市场监管重点难点。高端肉类产品附加值高，不法商家常以低价肉冒充高端肉；跨境调运、进口肉类还存在动物疫病传入风险；肉类基质营养丰富，易滋生沙门氏菌、单增李斯特菌等致病菌，对食品安全构成威胁。
分子检测（荧光定量PCR、DNA测序）是当前肉类真伪鉴定、疫病及致病菌筛查的主流技术，核酸提取是决定检测成败的关键前处理环节。肉类肌肉组织含有大量肌蛋白、脂肪、血红素等PCR抑制物；冷冻、熟制加工样本还会出现核酸降解，传统酚 - 氯仿提取法毒性大、耗时长；离心柱法人工操作步骤多，人员操作差异会造成结果波动，难以满足监管检测的标准化、可溯源要求。
磁珠法自动化核酸提取凭借其抗基质干扰、高通量、低气溶胶污染的优势，逐步替代手工提取。博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT-16T核酸提取仪基于磁珠吸附纯化原理，适配动物组织样本，单次可处理16个样本，仪器内置标准化提取程序，可用于肉类检疫与食品安全抽检。
一、材料与方法
（一）仪器与试剂
博清生物BHT-16T核酸提取仪；博清生物荧光定量PCR仪；肉类组织磁珠法核酸提取试剂盒；牛、羊、猪、鸭源性成分qPCR检测试剂盒；非洲猪瘟病毒、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒；核酸蛋白检测仪。
（二）样本制备
样本来源：市售高端生鲜牛肉、羊肉，冷冻调理肉制品；配置模拟掺假样本（高端羊肉中掺入1%、5%、10%猪肉）；疫病阳性组织样本、致病菌人工污染肉类样本；阴性空白肉类样本。
样本前处理：取20mg肌肉组织，使用组织研磨仪充分匀浆，设置平行样本，分别采用博清生物自动化磁珠提取与传统手工酚 - 氯仿法进行对比试验。
（三）核酸提取流程
博清BHT-16T磁珠法：将匀浆样本、裂解液、蛋白酶K加入提取板，上机选择肉类组织专用提取程序；仪器自动完成裂解、磁珠结合、洗涤、洗脱全流程，40min获得纯化DNA，洗脱体积50μL。
手工对照方法：酚 - 氯仿抽提法，严格按照食品分子检测常规操作步骤进行核酸纯化。
（四）核酸质量评价与下游PCR检测
采用紫外分光光度计测定核酸浓度与OD₂₆₀/OD₂₈₀比值；使用qPCR进行肉源物种鉴定、动物疫病及致病菌检测，记录Ct值，比较两种提取方法的扩增稳定性、阳性检出率。
二、结果与分析
（一）肉类样本核酸提取质量对比
博清生物BHT-16T核酸提取仪处理生鲜、冷冻高端肉类样本，核酸OD₂₆₀/OD₂₈₀稳定处于1.80～2.00区间，表明蛋白、脂类杂质去除效果良好，有效降低肉类基质对PCR扩增的抑制效应。同批次平行样本核酸浓度CV＜5%；手工提取组样本OD波动较大，平行样本CV＞12%，重复性较差。对于高温加工肉制品，自动化提取仍可回收降解 DNA，满足低含量源性成分检测要求。
（二）肉源掺假鉴别检测效果
模拟掺假样本检测结果显示，博清BHT-16T提取所得核酸，qPCR可稳定检出羊肉基质中1%比例的猪肉掺假组分，Ct值重复性良好；手工提取组在低掺假比例样本中，部分平行样本出现扩增失败、Ct漂移现象。该结果证明自动化磁珠提取适合高端肉类真伪鉴别，满足监管对微量掺假检出的要求。
（三）动物疫病与食源性致病菌检测
非洲猪瘟病毒、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌阳性肉类样本检测：博清自动化提取方法阳性检出率与国标手工提取方法结果完全一致，Ct值整体提前2～4个循环，说明核酸纯度更高，扩增抑制更少。仪器封闭体系减少开盖操作，显著降低核酸气溶胶污染风险，适合检疫实验室病原检测。
（四）仪器应用场景优势分析
博清BHT-16T核酸提取仪单次通量16样本，体积紧凑，支持预制提取程序，操作人员仅需完成样本加样，其余步骤由仪器自动执行，降低人员技术门槛；仪器自动记录运行参数，检测流程可追溯，符合市场监督检验实验室资质认定要求。设备适配三类典型监管场景：①高端肉类市场常态化抽检；②进口肉类、畜禽调运口岸检疫；③肉制品企业原料入厂质控。
三、讨论
高端肉类监管分子检测的核心瓶颈，在于复杂肉类基质下稳定、标准化核酸前处理。肉类样本中大量脂肪、血红素、蛋白质会抑制Taq酶活性，造成假阴性结果，这也是监管检测中容易引发争议的关键点。传统手工提取高度依赖操作人员经验，批次间差异大，难以满足行政执法取证对检测稳定性、可复现性的硬性要求。
本研究结果证实博清生物BHT-16T核酸提取仪磁珠纯化体系可有效去除肉类基质干扰物，核酸纯度、平行样重复性显著优于传统手工提取；对于生鲜肉、冷冻肉、熟制调理肉等不同基质样本均具备良好适应性，可同时支撑肉源物种鉴定、动物疫病核酸检测、食源性致病菌筛查三类监管项目。
相较于大通量96孔提取设备，16孔机型更加灵活，采购与运行成本更低，适合基层市场监管所、中小型肉类质检实验室；仪器操作流程简化，人员培训周期短，便于快速搭建肉类分子筛查能力。
博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT-16T核酸提取仪应用于高端肉类食品安全与检疫监管，可高效完成复杂肉类基质的核酸纯化，提取核酸纯度高、批内重复性好，下游荧光定量PCR检测结果稳定可靠，能够实现肉类掺假鉴别、动物疫病、食源性致病菌的精准筛查。该设备自动化程度高、操作安全、检测流程可追溯，适配市场监管、畜禽检疫、肉类企业质检等场景，为高端肉类市场质量安全监管提供可靠的核酸前处理技术装备支撑，助力肉类产品溯源、打击掺假造假，保障高端肉类消费安全。
