随着我国进出口食品贸易规模持续扩大，口岸食品安全监管压力不断提升，需要快速、精准完成入境食品的病原微生物筛查、物种成分鉴定、转基因成分甄别，防范食源性致病菌、外来有害生物、食品掺假等风险流入国内市场。分子生物学检测（qPCR、多重PCR、测序）是当前进出口食品检疫的主流技术手段，而核酸提取作为检测流程的基础步骤，核酸的得率、纯度直接决定后续检测灵敏度与结果可靠性。
进出口食品样本类型繁杂，生鲜肉类、水产、谷物、乳制品、罐头深加工食品基质差异巨大，深加工食品核酸存在降解严重，大量脂肪、多糖、蛋白等PCR抑制物极易造成扩增假阴性结果。传统手工酚‑氯仿法、离心柱提取方法操作繁琐，人为操作误差大，批量样本处理效率低下，难以适配口岸实验室大批量样本快速通关检测的需求。自动化磁珠法核酸提取技术凭借自动化程度高、抗干扰能力强、结果重复性好的优势，逐步成为口岸食品检疫前处理的主流方案。博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT‑16T核酸提取仪采用磁棒磁珠分离原理，适配多种食品样本试剂盒。
一、材料与方法
（一）仪器设备
博清生物BHT‑16T核酸提取仪；博清生物荧光定量PCR仪；高速冷冻离心机；微量核酸蛋白检测仪；组织研磨仪。
博清生物BHT‑16T核心参数：最大处理通量16个样本；5英寸触控屏幕，程序可自定义编辑；内置紫外消毒模块、HEPA过滤系统；多档振荡混匀速度可调，搭载加热模块，支持裂解、洗脱温控调节，具备过温保护，降低样本交叉污染风险，设备体积小巧，适合口岸实验室空间有限的工作环境。
（二）实验样本
样本来源于口岸进出口食品送检样品，涵盖进口畜禽肉类、水产品、粮谷、乳制品、罐头深加工食品。样本检测方向包括沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌等食源性致病菌；肉类水产品物种真伪鉴别；食品转基因成分筛查。阳性对照为标准菌株质粒与阳性组织样本，阴性对照采用无酶水。
（三）实验试剂
磁珠法食品样本基因组DNA/RNA提取试剂盒；食源性致病菌qPCR检测试剂盒；物种鉴定特异性引物探针；无酶水。
（四）样本前处理与核酸提取流程
食品样本按照进出口食品检验标准完成均质处理，取裂解上清液加入提取耗材板，放置于博清生物BHT‑16T核酸提取仪，调用食品样本专用提取程序。仪器自动完成裂解结合、磁珠吸附、多步洗涤、核酸洗脱全流程，全程无需人工值守。提取完成后收集洗脱核酸，使用微量分光光度计测定核酸浓度与A260/A280比值，评价核酸纯度；再进行荧光定量PCR扩增实验，对比手工离心柱提取方法，比较Ct值、检出率、批内批间变异系数。
二、结果与分析
（一）核酸提取质量评价
采用博清生物BHT‑16T处理多类型进出口食品样本，生鲜畜禽、水产样本核酸A260/A280比值集中在1.75‑1.95；深加工罐头、油脂含量高的食品样本，也可有效去除蛋白、脂肪、多糖类PCR抑制物，核酸纯度满足下游分子实验要求。同批次样本提取核酸浓度变异系数 CV≤4%，批间重复性良好，显著优于手工提取方式，手工提取受人员操作影响大，批间波动明显。针对核酸部分降解的加工食品样本，设备依旧可以获得有效模板核酸，降低假阴性风险。
（二）食源性致病菌检测应用效果
对口岸食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌等致病菌模拟阳性样本进行提取‑qPCR验证。BHT‑16T自动化提取组Ct值整体提前3‑5个循环，检测灵敏度优于手工提取，低浓度菌样本阳性检出率得到提升。设备封闭式舱体搭配紫外、HEPA防护，降低扩增子气溶胶交叉污染风险，适合口岸大量未知风险样本处理，满足进出口食品病原筛查要求。
（三）食品物种鉴别与掺假检测
进出口肉类、水产食品的物种真实性监管是口岸重要工作，部分深加工食品核酸降解严重。使用本设备提取食品基因组DNA后，开展物种特异性qPCR鉴定，可稳定识别混合基质中低占比异源动物源性成分，适用于进口肉制品掺假鉴别，为口岸打击食品经济掺假、标签不符问题提供技术基础。
（四）转基因成分筛查
进口粮谷、油料食品转基因成分检测，对核酸纯度要求高。经BHT‑16T提取的粮谷样本核酸可直接用于转基因元件qPCR检测，有效去除谷物多糖、酚类抑制物质，保证扩增反应稳定，适配进出口农产品转基因成分筛查监管场景。
（五）工作效率与场景适配
BHT‑16T单次可完成1‑16份进出口食品样本核酸提取，整套流程30‑45min完成，一键运行，实验参数自动记录保存，检测流程可追溯，符合检验实验室规范化管理。设备体积紧凑，既适合固定口岸实验室，也可适配移动检测单元，兼顾常规送检与应急抽检任务。相比传统手工提取，大幅减少人力投入，缩短样本前处理时长，助力进出口食品快速通关检测。
三、讨论
口岸进出口食品安全检疫工作，样本基质复杂多样，对核酸前处理设备提出多重要求：核酸提取稳定性强、抗基质干扰、操作标准化、生物安全可控、流程可溯源。传统手工提取方法人力消耗大，结果受操作人员经验影响，在大批量口岸样本检测场景中局限性明显。
博清生物BHT‑16T全自动核酸提取仪依托磁棒转移磁珠的技术路线，通过程序精准控制混匀、吸附、洗涤、洗脱全过程，降低人为引入误差；紫外消毒+ HEPA过滤系统有效管控气溶胶污染风险，适配病原样本生物安全管控需求。设备兼容市面主流食品类磁珠试剂盒，覆盖生鲜、深加工食品、粮谷、乳制品等多种进出口食品基质，提取产物可无缝对接荧光定量PCR仪、测序平台，完整覆盖致病菌检测、物种真伪鉴定、转基因筛查等口岸核心监管业务。
本研究也发现，对于高度加工、核酸重度降解的食品样本，需要配合食品专用裂解试剂盒进一步优化裂解程序，以此提升核酸回收效率。当前国产自动化核酸提取设备在口岸食品安全领域应用持续拓展，国产化仪器可以降低实验室设备采购维护成本，摆脱进口设备依赖，适合各级海关技术中心、口岸检疫实验室推广使用。
博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT‑16T核酸提取仪可高效完成进出口多类型食品样本的DNA、RNA自动化纯化，能够有效消除食品基质中蛋白、脂肪、多糖等PCR抑制物干扰，核酸提取质量稳定，重复性佳，适配食源性致病菌检测、物种真伪鉴别、转基因成分筛查等进出口食品监管场景。设备操作简便，具备污染防控设计，实验数据可追溯，满足口岸检疫标准化检测要求，为进出口食品安全分子检测提供可靠的国产化前处理解决方案，在口岸食品安全与进出口检疫监管领域具备良好推广应用前景。
