
随着转基因作物原料在食品加工产业广泛应用,我国食品安全法规要求含转基因原料的食品必须规范标注转基因标签。部分深加工食品在生产过程中经历蒸煮、压榨、灭菌等剧烈加工,DNA断裂降解,同时样品中多糖、蛋白、多酚、油脂等抑制物大量残留,传统手工柱提法提取核酸操作繁琐、人为误差大,难以满足大批量样品的快速筛查需求,直接影响转基因成分检测与标签真实性判定。
核酸提取是转基因分子检测的核心前处理环节,核酸质量直接决定后续PCR扩增成败。核酸提取仪基于磁珠法核酸纯化原理,能够自动化完成裂解、结合、洗涤、洗脱全流程,减少人工操作带来的交叉污染与操作偏差。博清生物科技(南京)有限公司研发的核酸提取仪,针对不同类型加工食品样品进行核酸提取,配套荧光定量PCR检测方法,评估提取核酸的浓度、纯度以及转基因目标基因检出效果,探究该设备在食品安全监管、出入境检疫中加工食品转基因标签验证工作的实用性。
一、材料与方法
(一)仪器与试剂
博清生物核酸提取仪;荧光定量PCR仪;核酸蛋白检测仪;高速冷冻离心机;组织研磨仪。磁珠法食品基因组核酸提取试剂盒;转基因阳性/阴性参考品;PCR引物与探针;无酶水。实验样品:市售豆制品、谷物膨化食品、罐头、饼干等加工食品,包含标注含转基因原料样品、未标注转基因样品、盲样。
(二)样品前处理
取食品可食用部分,使用组织研磨仪粉碎均质;称取一定量均质样品,加入裂解液充分裂解,去除食品基质中油脂、多糖等PCR抑制物,制备裂解上清,备用。
(三)核酸提取
采用博清生物核酸提取仪,磁珠法自动化提取。设置仪器程序,将裂解上清、磁珠、洗涤液、洗脱液置于耗材板,仪器自动完成核酸吸附、多步洗涤、洗脱,最终获得纯化基因组 DNA。同时设置手工柱法作为对照。
(四)DNA 质量检测
使用核酸蛋白检测仪测定DNA浓度与A260/A280比值,评估核酸纯度;采用荧光定量PCR对转基因元件(CaMV35S启动子、NOS终止子等)以及内参基因进行扩增,判断模板可用性。
(五)转基因标签验证判定
将PCR检测结果与产品标签信息比对:检出转基因元件而标签未标注,判定标签不合规;标签标注转基因成分且检出对应转基因元件,判定标签真实;未检出转基因元件则判定样品不含对应转基因成分。
二、结果与分析
(一)核酸提取质量
博清生物核酸提取仪提取的加工食品DNA样品A260/A280多处于1.7~2.0区间,核酸纯度良好。相比于手工提取,自动化提取产物批内、批间变异更小。对于高温灭菌罐头、深度膨化食品这类DNA严重降解样品,该设备仍可回收足量模板DNA,满足PCR扩增下限要求。手工提取组易出现多糖、蛋白残留,部分样品存在PCR抑制现象。
(二)转基因成分 PCR 检测结果
本实验盲样检测结果显示:博清生物核酸提取仪前处理后的样品,阳性参考品稳定检出转基因目标片段,阴性样品无假阳性。对标签标注转基因原料的样品均可检出对应转基因元件;部分未标注转基因的加工食品检出转基因成分,判定标签虚假标注。自动化提取体系扩增重复性优于手工方法,适合大批量检疫样品并行检测。
(三)设备应用优势
博清生物核酸提取仪实现样本核酸提取全流程自动化,大幅降低人工操作量,减少人为污染风险。一次可批量处理多个样品,缩短大批量食品检疫样品前处理周期,适配食品安全抽检、口岸检疫快速筛查需求;配套磁珠试剂盒针对复杂食品基质优化,耐受加工食品中各类PCR抑制物,在基质复杂的深加工食品转基因标签核验场景稳定性突出。
三、讨论
加工食品基质复杂、DNA降解严重,是转基因检测的难点。核酸提取环节如果无法有效去除食品中多糖、油脂等抑制物,会造成PCR扩增假阴性,进而导致标签验证误判。本研究证实,博清生物核酸提取仪磁珠纯化体系可有效去除深加工食品基质中的扩增抑制物,获得质量稳定的基因组DNA,保障后续转基因荧光定量PCR检测准确。
在食品安全监督抽检、进出口食品检疫工作中,待检样品数量大,对检测通量、结果稳定性、防污染能力均有较高要求。该设备自动化操作降低实验人员技术门槛,减少人工操作带来的结果偏差,适合基层食品安全实验室、口岸检疫实验室常态化开展加工食品转基因标签真实性筛查。
本研究仅针对常见加工食品基质开展试验,后续可拓展腌渍、发酵、高油脂等特殊加工食品基质,并优化提取程序,进一步拓展该设备在食品转基因检测、原料溯源、食品安全风险监测领域的应用范围。
博清生物科技(南京)有限公司研发的核酸提取仪可高效完成饼干、豆制品、膨化食品、罐头等加工食品基因组DNA提取,核酸纯度与回收率满足转基因成分荧光定量PCR检测要求,检测结果稳定,重复性好,可有效支撑加工食品转基因标签真实性验证工作。该设备自动化程度高,操作简便,适合食品安全抽检、进出口检疫大批量样品的前处理,可为食品转基因成分监管、标签合规性核查提供可靠的技术支撑。





