生鲜食品流通链条短、货架期有限，一旦携带沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌等致病菌，极易引发群体性食源性疾病。依据食品安全标准，分子生物学PCR检测方法已被列为生鲜食品致病菌快速筛查首选方法。核酸提取作为PCR检测的前置核心步骤，核酸纯度、完整性直接决定后续扩增结果可靠性。
生鲜样品基质干扰严重：畜禽肉类大量脂肪、肌浆蛋白，水产品内源蛋白酶、盐分，果蔬多酚、有机酸均会强烈抑制 Taq 酶活性，造成假阴性结果。常规离心柱提取、煮沸裂解法纯化效果有限；传统手工磁珠提取操作步骤多、人员操作差异大，大批量出厂样本检测效率低下，无法满足生鲜产品“当日检测、当日放行”的产业需求。
核酸提取技术凭借程序化密闭操作、杂质高效去除、批次稳定等优势，正在食品检测领域快速普及。博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT-16T核酸提取仪采用磁棒转移磁珠工作原理，搭载恒温震荡模块、内置紫外消毒与 HEPA 防护，支持 1～16 样本灵活处理，设备小型化，适配食品企业质检实验室有限场地。
一、材料与方法
（一）仪器与试剂
1、仪器：博清生物BHT-16T核酸提取仪、博清生物荧光定量PCR仪、高速组织均质器、紫外分光光度计；
2、试剂：磁珠法食品样本基因组核酸提取试剂盒；沙门氏菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌qPCR检测试剂盒；标准菌株（CMCC标准菌株）；
3、实验样品：市售生鲜猪肉、南美白对虾、鲜生菜，经预检测确认无目标致病菌污染，用于人工加标试验；生鲜加工厂送检真实出厂样品。
（二）样品前处理
取生鲜样品25g，加入225mL无菌生理盐水均质，静置分层；吸取上清液作为待处理样本。设置梯度人工污染样本，菌浓度范围101~106CFU/g。
（三）核酸提取方案
1、实验组（博清生物 BHT-16T 自动化提取）
取 200 μL 样品上清加入预制深孔板，添加裂解液、磁珠；仪器内置程序自动完成裂解、核酸结合、三次洗涤、洗脱全过程；设置裂解温度 65 ℃，震荡转速多档可调，总运行时长 28～32 min，洗脱体积 80 μL。设备自带紫外消毒程序，批次实验前后开展腔体消杀，预防交叉污染。
2、对照组：传统手工磁珠核酸提取法
严格按照同款试剂盒说明书手动操作，离心、移液、磁分离步骤人工完成。
（四）指标检测
1、核酸纯度与浓度：紫外分光光度计测定A260/A280、核酸浓度；
2、qPCR扩增：采用致病菌特异性引物探针体系，对比两组Ct值、阳性检出率；
3、稳定性试验：同一批次16份平行样品提取，计算Ct变异系数CV；
4、检出限测试：梯度加标样品对比两种提取方法最低检出浓度；
5、实际样品验证：收集生鲜企业52份出厂生鲜样品并行检测。
二、结果与分析
（一）核酸提取质量对比
经检测，博清生物BHT-16T自动化提取组所有生鲜样品核酸A260/A280为1.82～2.03；手工提取组波动范围1.64～2.18，部分水产、高脂肉类样本出现蛋白残留，比值偏低。说明自动化程序化洗涤流程能够稳定去除生鲜基质中的脂肪、蛋白、多酚类抑制物，核酸纯化效果更稳定。
（二）检测重复性结果
自动化提取平行样本 qPCR Ct 值变异系数 CV=2.71%；手工提取组 CV=7.56%。手工操作中磁珠吸附、洗涤时间、移液误差会持续引入偏差；BHT-16T 全程机械标准化执行，消除人为操作差异，适合出厂检验结果溯源、数据标准化管理。
（三）灵敏度与检出限
在生鲜猪肉、水产品基质中，博清生物自动化提取方案联合 qPCR 对目标致病菌检出限可达 10 CFU/g；同等条件下手工提取部分高脂样品检出限仅 100 CFU/g。自动化体系核酸回收率更高，基质抑制剂去除更充分，有效降低生鲜样本假阴性风险。
（四）实际生鲜出厂样品检测
52 份生鲜出厂样品同步检测：自动化方案检出 3 份阳性（2 份生鲜虾副溶血性弧菌、1 份猪肉沙门氏菌），手工方案仅检出 2 份阳性。证实自动化提取在真实复杂生鲜基质中具备更可靠的筛查能力，有助于企业在出厂环节及时发现污染样品，阻断问题产品流入市场。
（五）应用效率综合评估
单次最多处理 16 份样本，一轮提取耗时约 30 min；连续检测可实现日均批量处理上百份生鲜样品。设备体积紧凑，无需配套大型离心设备；内置紫外消杀、一次性磁棒套设计，大幅降低气溶胶交叉污染风险。相比手工提取，人力投入减少 60% 以上，完美匹配生鲜企业大批量产品快速出厂放行的时效要求。
三、讨论
生鲜食品出厂检疫具有样本量大、基质复杂、时限要求高三大特点。核酸前处理是制约分子快速检测落地的主要瓶颈。大量实践证明，手工提取方法高度依赖操作人员熟练度，难以在食品生产质检实验室建立统一标准。
博清生物BHT-16T核酸提取仪依托磁棒转移磁珠技术，密闭式自动化流程有效解决生鲜样本脂肪、盐分、植物多酚等干扰物去除难题。仪器支持自定义提取程序，可针对肉类、水产品、果蔬不同生鲜基质优化裂解、洗涤参数，适配多元化生鲜生产线检测需求。16 通量设计兼顾中小型生鲜加工厂检测规模，避免 96 通道设备闲置、成本过高的痛点，设备性价比更适合食品企业质检场景。
博清生物科技（南京）有限公司研发的BHT-16T核酸提取仪应用于生鲜食品出厂检疫，可高效从畜禽肉、水产品、鲜切果蔬等复杂生鲜基质中获得高纯度核酸。相比传统手工提取，具备结果稳定、重复性优良、灵敏度高、操作简便、污染风险低等优势，能够支撑生鲜加工企业落实常态化致病菌出厂筛查，缩短检测周期，保障生鲜食品安全管控。该设备建立的自动化核酸前处理方案，可作为生鲜食品分子检测标准化配套方案，在生鲜加工企业质检实验室、第三方食品检测机构推广应用。
