肿瘤细胞代谢重编程是恶性转化的标志性特征，其中有氧糖酵解（Warburg 效应）最为关键：即使在氧充足条件下，肿瘤细胞仍优先通过糖酵解分解葡萄糖，生成乳酸并释放少量 ATP，同时为生物合成提供中间产物，助力肿瘤快速增殖、微环境酸化及免疫逃逸。因此，精准检测糖酵解活性、解析调控机制并筛选靶向抑制剂，是肿瘤基础研究与药物研发的核心方向。
当前肿瘤糖酵解检测方法包括同位素标记法、高效液相色谱法、质谱法及细胞能量代谢分析仪检测法等，但存在操作复杂、成本高昂、通量低或动态监测能力不足等局限。酶标仪凭借高通量、多模式检测、实时动态追踪、成本可控等优势，成为常规实验室开展糖酵解研究的首选设备。博清生物科技（南京）有限公司研发的WKB-96型酶标仪作为国产高性能微孔板读数仪，整合线性 PMT 检测、双激发光源补偿及共聚焦抗干扰技术，兼顾高灵敏度、宽动态范围与操作便捷性，为肿瘤糖酵解多维度检测提供一站式解决方案。
一、博清生物 WKB-96 型酶标仪核心技术与性能优势
（一）核心技术原理
博清生物 WKB-96 型酶标仪采用顶部读取式光路设计，搭载创新线性 PMT 检测技术与双激发光源补偿系统，可有效抑制环境光干扰与孔间交叉污染，提升检测信噪比与数据稳定性。设备支持吸光度（Abs）、化学发光（CLIA）、时间分辨荧光（TRF） 三种检测模式，兼容 96 孔不透明微孔板，适配糖酵解研究中终点定量、动态动力学监测及多指标联合检测需求。
（二）关键性能优势
1、超高检测灵敏度与精准度
灵敏度可达100 pg/mL，适配低浓度代谢物（如微量乳酸、ATP）检测；
吸光度重复性<3%，通道差异≤0.02 OD，确保多复孔数据一致性；
2、精准温控与动态监测能力
内置室温–45℃精准温控系统，温度稳定性 ±0.4℃，完美模拟肿瘤细胞 37℃培养环境，支持长时间实时动力学监测（如 ECAR 动态变化、酶活性时间梯度分析）；
振板功能可调（速度/时间），确保试剂与样品充分混匀，减少反应误差。
3、高通量与智能化操作
96 孔板同步检测，单波长≤3 秒/板，大幅提升大批量样品（如药物筛选、多浓度梯度实验）检测效率；
全中文操作软件，支持可视化布板、标准曲线自动生成、数据一键导出，可存储多个实验程序与数份数据，降低操作门槛。
4、抗干扰与兼容性强
共聚焦技术有效抑制非特异性荧光与背景干扰，适配复杂生物样品（如细胞上清、裂解液）检测；
兼容市售主流糖酵解检测试剂盒（葡萄糖、乳酸、ATP、HK2/LDHA 酶活性及 ECAR 荧光探针试剂盒），无需定制化适配，降低实验成本。
二、博清生物酶标仪在肿瘤细胞糖酵解研究中的核心应用
肿瘤糖酵解研究需从代谢物水平、关键酶活性、细胞外酸化动态多维度评估，博清生物 WKB-96 型酶标仪可覆盖全流程检测，具体应用如下：
（一）葡萄糖摄取与乳酸生成定量检测
葡萄糖摄取率与乳酸生成量是反映肿瘤糖酵解活性的核心终点指标。实验流程：将肿瘤细胞（如胃癌 BGC-823、肝癌 HepG2）接种于96孔板，经药物/基因干预后，收集细胞上清，采用葡萄糖检测试剂盒（450 nm）与乳酸检测试剂盒（530 nm）显色反应，酶标仪读取吸光度值，结合标准曲线计算葡萄糖消耗量与乳酸生成量，评估糖酵解整体活性。
实验案例：某团队利用 WKB-96 型酶标仪检测沉默 lncRNA CCAT2 后胃癌细胞糖酵解变化，结果显示：沉默组葡萄糖摄取率下降 42.3%，乳酸生成量减少 38.7%（P<0.01），与 Western blot 检测的糖酵解关键酶（GLUT1、HK2）表达下调结果一致，验证了该设备在代谢物定量中的可靠性。
（二）ATP 含量与糖酵解关键酶活性分析
ATP 是糖酵解的直接产物，而己糖激酶 2（HK2）、乳酸脱氢酶 A（LDHA）、磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解限速酶，其活性直接决定糖酵解通量。
ATP 检测：采用化学发光法试剂盒，细胞裂解后加入发光试剂，酶标仪化学发光模式检测发光强度，ATP 浓度与发光强度呈正相关，灵敏度可达 nmol 级，适配微量细胞样品检测；
酶活性检测：通过酶联反应体系，检测 HK2（340 nm）、LDHA（530 nm）催化底物的吸光度变化，计算酶活性，WKB-96 型酶标仪的宽动态范围（0–4 OD） 可兼顾高低活性样品检测。
（三）细胞外酸化率（ECAR）动态监测
细胞外酸化率（ECAR）是实时反映糖酵解动力学活性的核心指标，肿瘤细胞糖酵解增强时，乳酸大量分泌导致胞外pH下降，酸化速率加快。博清生物WKB-96型酶标仪结合 BBcellProbe® P61 酸化荧光探针试剂盒，可在37℃温控条件下，每 5 分钟采集一次荧光信号，连续监测 24 小时，动态追踪药物干预或基因调控下糖酵解活性的瞬时变化，弥补传统终点法无法捕捉动态波动的缺陷。
优势对比：相较于专用细胞能量代谢分析仪（如 Seahorse），WKB-96 型酶标仪检测成本降低 60% 以上，且兼容常规 96 孔板，无需特殊耗材，适合大规模药物筛选实验。
（四）高通量药物筛选与糖酵解抑制剂疗效评估
肿瘤糖酵解靶向药物研发需对数百种化合物进行批量筛选，评估其对糖酵解活性的抑制效果。博清生物 WKB-96 型酶标仪的96 孔高通量检测能力，可同时设置空白对照、阴性对照、不同药物浓度梯度（6–8 个梯度）及 3–5 个复孔，一次性完成上百个样品检测，结合智能化数据分析软件，自动计算抑制率、IC50 值，快速筛选高效低毒的糖酵解抑制剂（如 HK2 抑制剂、LDHA 抑制剂）。
三、实验验证：博清生物酶标仪的可靠性与稳定性
为验证 WKB-96 型酶标仪在肿瘤糖酵解研究中的性能，本研究以肝癌 HepG2 细胞为模型，检测不同培养时间（24 h、48 h、72 h）及不同葡萄糖浓度（5 mM、10 mM、25 mM）条件下的乳酸生成量，评估设备的重复性、稳定性与线性相关性。
（一）重复性实验
同一细胞样品设置 6 个复孔，检测乳酸生成量，结果显示：复孔间 CV 值 < 2.5%，数据离散度低，符合科研实验重复性要求。
（二）稳定性实验
同一样品连续检测 5 次，间隔 30 分钟，吸光度值波动 < 0.008 OD，表明设备长时间检测稳定性良好，适配长时间 ECAR 动态监测实验。
（三）线性相关性实验
葡萄糖浓度 5–25 mM 范围内，乳酸生成量与葡萄糖浓度呈显著正相关（R²=0.997），与理论预期一致，验证了设备定量检测的准确性。
四、讨论
肿瘤糖酵解作为肿瘤代谢领域的研究热点，其检测技术的精准度与效率直接影响科研进展。博清生物科技（南京）有限公司研发的WKB-96型酶标仪凭借高灵敏度、多模式检测、精准温控、高通量低成本等核心优势，完美适配肿瘤糖酵解研究中代谢物定量、酶活性分析、动态监测及药物筛选等全场景需求，为常规实验室提供了高性能、国产化、易操作的检测解决方案，打破了进口设备的技术垄断与高成本壁垒。
相较于传统检测设备，博清生物酶标仪的核心突破在于兼顾精准度与实用性：其共聚焦抗干扰技术解决了复杂生物样品检测的背景干扰问题，温控动态监测功能实现了糖酵解活性的实时追踪，而高通量设计则大幅提升了药物筛选效率，尤其适合大规模科研项目与药物研发。
博清生物科技（南京）有限公司研发的WKB-96型酶标仪是肿瘤细胞糖酵解研究的理想检测工具，其优异的检测性能、灵活的检测模式与便捷的操作设计，可全面满足葡萄糖摄取、乳酸生成、ATP 含量、关键酶活性及 ECAR 动态监测等核心实验需求，在糖酵解机制解析、靶向药物筛选及疗效评估中具有重要应用价值。作为国产化高性能科研设备，博清生物酶标仪为肿瘤代谢研究提供了高效、精准、经济的技术支撑，具有广阔的科研应用前景与推广价值。
