
恶性肿瘤已成为威胁人类健康的重大公共卫生问题,2021 年中国死因监测数据集显示,恶性肿瘤位居居民死亡原因第二位,占全部死因的 23.13%。肿瘤发生的核心生物学本质是细胞基因组稳定性破坏,原癌基因异常激活、抑癌基因功能失活、非编码 RNA 调控紊乱及表观遗传修饰异常,共同驱动细胞增殖失控、凋亡抑制、侵袭转移等恶性表型。
传统肿瘤检测依赖病理形态学观察,难以从分子层面解析发病机制;而基因芯片、高通量测序等技术虽通量高,但存在成本昂贵、操作复杂、检测周期长等局限,难以适配常规实验室大规模样本筛查与机制验证需求。荧光定量 PCR 技术通过实时监测扩增过程中荧光信号变化,实现目标核酸的绝对定量,完美契合肿瘤基因研究“精准、高效、低成本”的核心需求。
博清生物科技(南京)有限公司深耕分子诊断仪器研发,推出 8孔、16孔、96 孔等系列荧光定量 PCR 仪,集成精准温控、高灵敏光学检测、便捷操作系统等核心技术,适配肿瘤组织、细胞、外周血等多种样本类型,为肿瘤基因检测与发生机制研究提供稳定可靠的技术平台。
一、博清生物荧光定量 PCR 仪核心技术性能优势
博清生物荧光定量 PCR 仪针对肿瘤基因检测 “微量样本精准定量、多基因并行检测、复杂样本兼容” 等痛点,优化温控系统、光学检测系统及软件算法,核心性能如下:
(一)精准温控系统,保障扩增一致性
采用自主研发实时动态精准温控技术,搭载定制半导体制冷模块,温控范围4~100℃,最大升降温速率≥6℃/s,温度均匀性≤±0.15℃。有效避免肿瘤样本(如石蜡包埋组织、微量穿刺样本)扩增过程中非特异性产物生成、扩增效率差异等问题,确保不同样本、不同基因扩增结果的重复性与可靠性,适配肿瘤机制研究中多批次、大样本对比实验需求。
(二)高灵敏光学检测,适配微量肿瘤样本
配置长寿命免维护 LED 光源 + 高灵敏度光电检测器,激发波长 455-650nm,发射波长 510-750nm,支持4 色荧光检测通道(FAM、VIC、HEX、CY5),可同时检测 2-4 种目标基因,实现原癌基因、抑癌基因、内参基因的并行定量。检测灵敏度达单拷贝基因水平,线性范围 1~10¹⁰ copies,完美适配肿瘤样本(如少量活检组织、循环肿瘤 DNA)中低丰度突变基因、微量非编码 RNA的精准检测。
(三)灵活通量与便捷操作,适配多场景研究需求
1、通量灵活:覆盖8 孔、16 孔(BOD-16PE)、96 孔多种模块,兼容 0.1mL单管、八联排管及 96 孔板,样本体积 10-50μL,可满足小规模机制验证(8/16 孔)与大规模样本筛查(96 孔)的不同需求。
2、操作便捷:内置 7 寸高清触控屏,菜单式导航界面,无需连接 PC 即可独立运行,实时监控扩增曲线、自动分析 Ct 值;支持数据 USB 导出与多格式保存,适配肿瘤研究数据追溯与统计分析需求。
(四)高特异性与抗干扰能力,适配复杂肿瘤样本
采用特异性探针/染料双重检测模式(SYBR Green 染料法、TaqMan 探针法),有效区分同源序列、避免非特异性扩增,适配肿瘤样本中高 GC 含量基因、同源家族基因的定量检测;针对血液、组织匀浆等复杂样本,优化反应体系抗干扰算法,降低杂质对荧光信号的影响,确保肿瘤相关基因检测结果的准确性。
二、博清生物 qPCR 仪在肿瘤发生机制研究中的核心应用
肿瘤发生机制研究核心聚焦基因结构异常、表达调控紊乱、信号通路失衡三大方向,博清生物 qPCR 仪凭借精准定量、多基因并行检测优势,贯穿 “基因筛选 - 表达验证 - 机制解析 - 通路验证” 全流程,具体应用如下:
(一)原癌基因异常激活检测,解析肿瘤驱动起始机制
原癌基因(如RAS、MYC、BRAF)在正常细胞中参与增殖调控,异常扩增、突变或过表达时,会驱动细胞恶性转化,是肿瘤发生的起始关键事件。
博清生物 qPCR 仪可通过TaqMan 探针法精准检测原癌基因点突变、拷贝数变异及 mRNA 表达水平:
1、突变检测:针对BRAF V600E、KRAS G12D等热点突变设计特异性探针,仅需 5ng 基因组 DNA 即可实现突变精准分型,灵敏度达 0.1% 突变率,适配甲状腺癌、结直肠癌等肿瘤早期突变筛查。
2、表达定量:采用 SYBR Green 染料法,以 β-actin、GAPDH 为内参,通过 2^(-ΔΔCt) 法计算原癌基因相对表达量,揭示MYC 扩增、HRAS 过表达与肺癌、肝癌发生的关联性。
(二)抑癌基因失活检测,揭示肿瘤增殖失控机制
抑癌基因(如TP53、PTEN、RB)通过调控细胞周期、修复 DNA 损伤、诱导凋亡抑制肿瘤发生,基因突变、启动子高甲基化、表达沉默是其失活的主要方式,直接导致细胞增殖失控、凋亡抑制。
博清生物 qPCR 仪可从基因序列、表达水平、表观修饰多维度检测抑癌基因失活:
1、表达沉默检测:定量检测TP53、PTEN mRNA 表达,揭示其在胃癌、乳腺癌中的表达下调与肿瘤恶性程度的负相关性。
2、甲基化检测:结合亚硫酸氢盐转化技术,通过甲基化特异性 qPCR(MSP-qPCR)检测抑癌基因启动子区甲基化水平,如PTEN 启动子高甲基化导致其表达沉默,进而激活 PI3K/AKT 信号通路,驱动子宫内膜癌发生。
(三)非编码 RNA 调控检测,解析肿瘤表观遗传机制
非编码 RNA(miRNA、circRNA、lncRNA)通过靶向降解 mRNA、抑制翻译、调控表观修饰参与肿瘤发生,是连接基因与表型的关键调控分子。博清生物 qPCR 仪凭借高灵敏度、宽线性范围,适配微量非编码 RNA 的精准定量,助力解析其在肿瘤中的调控机制。
1、miRNA 检测:miRNA 长度仅 22nt 左右,表达丰度极低,博清生物 qPCR 仪可通过茎环引物反转录 + 特异性探针扩增,精准检测 miR-128-3p、miR-135a-5p 等在胶质瘤、乳腺癌中的表达变化。研究证实 miR-128-3p 在胶质瘤中低表达,通过靶向抑制 HOXA5 表达,促进胶质瘤细胞增殖、侵袭,抑制凋亡。
2、circRNA/lncRNA 检测:采用跨反向剪接位点引物,特异性扩增 circRNA(如 circTHBS1),定量其在乳腺癌中的表达,揭示 circTHBS1 通过调控 miR-135a-5p/RAB1A 轴,促进乳腺癌细胞恶性增殖与转移的机制。
(四)信号通路关键基因检测,阐明肿瘤微环境与代谢重编程机制
肿瘤发生伴随信号通路异常激活、代谢重编程、微环境失衡,如 MAPK、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin 通路异常,糖酵解代谢增强,共同驱动肿瘤进展。博清生物 qPCR 仪可并行定量通路中多个关键基因,揭示通路激活机制及基因间调控关系。
1、信号通路验证:检测 MAPK 通路中RAF、MEK、ERK及 PI3K/AKT 通路中PI3K、AKT、mTOR mRNA 表达,证实BRAF 突变持续激活 MAPK 通路,促进黑色素瘤细胞增殖;而PTEN 失活激活 PI3K/AKT 通路,抑制肿瘤细胞凋亡。
2、代谢重编程检测:定量糖酵解关键基因HK2、PFK1、PKM2表达,揭示肿瘤细胞 “有氧糖酵解” 机制。如结直肠癌中 HuR 蛋白高表达,促进 PFK1 mRNA 稳定性,增强糖酵解能力,为肿瘤细胞增殖提供能量与生物合成原料。
肿瘤发生机制研究是肿瘤防控的核心基础,精准、高效的基因检测技术是推动研究突破的关键支撑。博清生物科技(南京)有限公司研发的荧光定量 PCR 仪凭借精准温控、高灵敏光学检测、灵活通量、便捷操作等核心优势,完美适配肿瘤原癌基因激活、抑癌基因失活、非编码 RNA 调控、信号通路失衡等多维度机制研究需求,从基础机制解析到样本转化,为肿瘤研究提供了稳定可靠的技术平台。





